| 外泌体提取试剂盒(EVtrap)
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产品介绍 FAQ 说明书 外泌体提取试剂盒(EVtrap)产品详情 产品简介 本试剂盒采用磁珠捕获法提取外泌体,试剂盒中的功能性修饰的磁珠可以特异性地捕获样本中总的外泌体(EVs);本试剂盒能从尿液、唾液等体液样本或细胞上清中高效提取外泌体,无需超速离心,可同时操作多个样本。 产品特点 兼容性广:可满足多种不同类型的样本,如尿液、细胞上清、唾液、脑脊液等。 操作简便: 无需超离,仅需2 h。 性价比高: 多种样本,一盒搞定。 产品原理
图1. EVtrap作用原理 产品数据
图2.使用EVtrap提取的外泌体WB检测结果(1 mL尿液) Q1:磁珠法相较于超离的方法分离外泌体有什么不同? A1:传统超离方法通过低速离心除去细胞、大细胞碎片,高速离心除去小细胞碎片、大囊泡,最后超速离心得到外泌体,该方法是最简单常用的方法,然而过程复杂、耗时久且有设备要求,同时回收率不稳定。磁珠法通过在表面装载亲和分子实现对外泌体的高效捕获,通过下游洗脱程序分离得到外泌体,无需超离,更加的高效省时。
Q2:使用EVtrap试剂盒提取外泌体时,我还需要准备哪些仪器和耗材? A2:移液器、1.5 mL离心管、涡旋振荡器Vortex、低温高速离心机、磁力架、0.22 μm滤膜。
Q3:提取完外泌体后,如何鉴定外泌体是否合格? A3:鉴定外泌体通常是3种实验互相验证 (TEM、NTA和WB);其中,使用透射电镜检测形态,粒径检测大小、Western blot检测外泌体标志性蛋白等方法相互佐证提取的外泌体是否合格。在进行Western blot检测时,通常检测外泌体标志蛋白 (CD63、CD9、CD81、TSG101等),还需要至少一个阴性蛋白,比如内质网标记蛋白Calnexin。
Q4:使用EVtrap试剂盒能提取到多少外泌体? A4:提取的外泌体数量根据样本类型不同会有差异。经过我们的测试,20 mL细胞上清能提取9×109 particles,5 mL尿液能提取1×1010particles,500 uL脑脊液能提取1×109particles。
Q5:EVtrap、EVlent™和SEC纯化试剂盒有什么区别,我该如何选择? A5:
Q6:粘度过大的样品如何处理? A6:如果样品粘度过大时(因细胞分泌物较多所致),可将样品用1×PBS缓冲液进行稀释,混匀稀释后的样品再使用试剂盒提取外泌体。 |
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